Bagaimana Analisis Kuantitatif Dengan Metode Spektrofotometri Uv/Vis?
Langkah-langkah utama dalam analisis kuantitatif dengan spektro-fotometer UV-Vis.
-
Pembentukan molekul yang menyerap sinar tampak. Bila molekul yang dianalisis tidak menyerap daerah sinar tampak maka dilakukan reaksi pembentukan warna, yang dapat melakukan penyerapan.
-
Pemilihan panjang gelombang (kurva serapan).
-
Pembuatan kurva kalibrasi.
-
Pengukuran absorbans.
Analisis kuantitatif dengan spektrofotometer dapat dilakukan dengan:
Dasar dari penentuan dengan spektrofotometer adalah Hukum Lambert Beer. A = εbC
Cara Pembandingan
Suatu larutan yang akan ditentukan konsentrasinya dibandingkan terhadap standar yang telah[diketahuinya.
AS= cbCs
Ax = cbCx
E dan b sama maka Cx = As.Cs/Ax.
Cara Adisi Standar
Dalam analisis dengan metode ini dilakukan dengan menambahkan larutan standar ke dalam larutan cuplikan dan pengukuran absorbans terhadap larutan cuplikan maupun campuran cuplikan dan standar.
Metode Adisi Standar
Ke dalam sederet tabung reaksi masing-masing diisi larutan contoh Vx mL dengan konsentrasi Cx, larutan standar bervariasi Vs1, Vs2 … mL dengan konsentrasi Cs dan pereaksi pembentuk warna, lalu diencerkan hingga tanda batas. Terhadap tabung-tabung tersebut, dilakukan pengukuran absorbansi. Dari hasil pengamatan plot absorbansi terhadap konsentrasi larutan standar yang merupakan garis lurus.
Plot Volume terhadap Absorbansi
Cara Kurva Kalibrasi
Penentuan dengan cara ini dilakukan dengan mengukur absorbansi larutan standar yang konsentrasinya bervariasi dan larutan contoh. Dan masing-masing hasil pengukuran dibuat kurva A terhadap konsentrasi dari larutan standar sehingga diperoleh garis lurus. Nilai absorbansi sampel diekstrapolasi terhadap kurva garis lurus sehingga konsentrasi dari sampel dapat diketahui.
Kurva Kalibrasi
Contoh soal:
Serapan 10 mL larutan Co2+ 0,0005 M adalah 0,35. 10 mL larutan tersebut dicampur dengan 10 mL larutan cuplikan menghasilkan serapan 0,52. Hitung konsentrasi Co2+ dalam sampel.
Pelaksanaan analisis menggunakan spektrofotometer dapat dilakukan terhadap:
-
analisis kuantitatif zat tunggal (analisis satu komponen),
-
analisis kuantitatif campuran dua komponen atau lebih (analisis multikomponen).
Analisis Multikomponen
Syarat yang harus dipenuhi untuk analisis ini adalah bahwa komponen-komponen yang ada tidak saling berinteraksi. Absorpsi total larutan pada panjang gelombang tertentu merupakan jumlah absorpsi tiap komponen yang ada.
Absorpsi Campuran Ni + Co
Absorpsi campuran dapat ditentukan secara eksperimen, konsentrasi masing-masing komponen dapat dihitung.